|
|
Regulace tvorby kostní tkáně pomocí osteogenních suplementů v modelu osteoporózy
Krčmářová, Eliška ; Filová, Eva (vedoucí práce) ; Zadražil, Zdeněk (oponent)
Osteoporóza je onemocnění kostního metabolismu charakteristické úbytkem kostní hmoty. Příčinou tohoto onemocnění je dysbalance mezi tvorbou nové kostní hmoty osteoblasty a resorpcí kostní tkáně osteoklasty, ve prospěch kostní resorpce. Rizikovou skupinou p tohoto onemocnění jsou ženy po menopauze, u kterých v tomto období přirozeně dochází poklesu hormonu estrogenu. Estrogen působí jako inhibitor proosteoklastových faktorů, ligand vážící se na receptor aktivující jaderný faktor κB faktor nádorové nekrózy α. Nerovnováha kostního metabolismu může být mimo jiné zapříčiněna i dysbalancí v produkci Prostaglandinu E2 (PGE2) a 1α,25 . Jedná se o silné mediátory, které mohou stimulo závislosti na podmínkách kultury/ko této práci byl přezkoumán vliv těchto mediátorů (PGE2 v 1α,25 otkaních mononukleárních buněk periferní krve (PBMC) v přítomnosti osteoblastů, bez nebo s kombinací proosteoklastových ů stimulující kolonie makrofágů Osteoklastogeneze byla stimulována, pokud byly PGE2 a 1α,25 kombinovány s výjimkou PGE2 10 M, který vykazoval inhibiční efekt. Přidávání pouze PGE2 nebo 1α,25 nebylo dostatečné pro iniciaci osteoklastogeneze. Potenciál osteoklastogeneze byl sledován i u buněk izolovaných z potkanů s indukovanou osteoporózou pomocí ovariektomie. PBMC izolované z těchto jedinců ukázaly schopnost diferenciace v...
|
|
|
In vitro kultivace tasemnice Hymenolepis diminuta - 2
Jandura, Dominik ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Dominik Jandura Školitel: PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro kultivace tasemnice Hymenolepis diminuta - 2 Náplní této diplomové práce bylo získat cysticerkoidy tasemnice krysí (Hymenolepis diminuta), excystovat je a najít podmínky pro maximální dobu inkubace in vitro. Jako mezihostitel byl užit potemník moučný (Tenebrio molitor) infikován potkaním trusem obsahujícím vajíčka tasemnice. Excystace byla prováděna prostřednictvím L-cysteinu a tauroglykocholátu sodného. Excystované larvy byly in vitro kultivovány (37 řC, 5 % CO2) v médiu RPMI 1640 obohaceném o další látky vybrané na základě předchozích metod. Jednalo se zejména o extrakty z potkaních, myších a ovčích jater, případně v kombinaci s kvasnicovým extraktem a ovčí žlučí. Vliv testovaných látek na kultivaci byl hodnocen měřením nárůstu tasemnic. Nejlepší vliv mělo médium obsahující sérum, kvasnicový extrakt a extrakt z ovčích jater, kde tasemnice k 16. dni dosahovaly velikosti 1561 µm. Další růst byl limitován výskytem patologických útvarů.
|
|
|
In vitro kultivace tasemnice Hymenolepis diminuta - 2
Jandura, Dominik ; Vokřál, Ivan (vedoucí práce) ; Raisová Stuchlíková, Lucie (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Student: Dominik Jandura Školitel: PharmDr. Ivan Vokřál, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro kultivace tasemnice Hymenolepis diminuta - 2 Náplní této diplomové práce bylo získat cysticerkoidy tasemnice krysí (Hymenolepis diminuta), excystovat je a najít podmínky pro maximální dobu inkubace in vitro. Jako mezihostitel byl užit potemník moučný (Tenebrio molitor) infikován potkaním trusem obsahujícím vajíčka tasemnice. Excystace byla prováděna prostřednictvím L-cysteinu a tauroglykocholátu sodného. Excystované larvy byly in vitro kultivovány (37 řC, 5 % CO2) v médiu RPMI 1640 obohaceném o další látky vybrané na základě předchozích metod. Jednalo se zejména o extrakty z potkaních, myších a ovčích jater, případně v kombinaci s kvasnicovým extraktem a ovčí žlučí. Vliv testovaných látek na kultivaci byl hodnocen měřením nárůstu tasemnic. Nejlepší vliv mělo médium obsahující sérum, kvasnicový extrakt a extrakt z ovčích jater, kde tasemnice k 16. dni dosahovaly velikosti 1561 µm. Další růst byl limitován výskytem patologických útvarů.
|
|
|
Somatická embryogeneze jehličnanů: popis strukturálního vývoje
Kadlecová, Marie ; Albrechtová, Jana (vedoucí práce) ; Konrádová, Hana (oponent)
Somatická embryogeneze je velmi důležitým nástrojem kultivace rostlin in vitro, proto se jí v poslední době zaslouženě věnuje náležité pozornosti. Celý proces somatické embryogeneze zahrnuje několik po sobě jdoucích kroků: indukce embryogenní kultury a její proliferace, zrání embryí (maturace), desikace, klíčení a následná přeměna embryí v mladé rostliny. Všechny tyto kroky bezprostředně ovlivňuje mnoho faktorů, jakými jsou například: výběr použitého explantátu, doba kultivace, fyzikální podmínky a z velké části hlavně složení média, na kterém jsou somatická embrya kultivována. Stále se objevují nové studie popisující možnosti zlepšení kultivačních podmínek, a tím posléze i kvalitu embryí. Důležitým předpokladem dalšího zlepšení kvality somatických embryí je znalost přesného kultivačního protokolu, tj. jaké koncentrace jsou látky obsažené v médiu, doba trvání jednotlivých kroků, použití nevhodnějšího výchozího explantátu atd. Další neméně důležitou věcí je dobrá znalost vývoje všech anatomických struktur vznikajících během embryogeneze. Jen tak bude možné se přiblížit bodu, kdy somatická embrya nebudou vznikat pouze v laboratoři, ale budou úspěšně využívána i v praxi. Předmětem této práce je shrnutí dosavadních poznatků o vývoji anatomických struktur vznikajících během somatické embryogeneze. V...
|
|
|
Vliv donoru sulfanu a česnekových derivátů na meiotické zrání a stárnutí prasečích oocytů
Dvořáková, Markéta ; Sedmíková, Markéta (vedoucí práce) ; Miloslava, Miloslava (oponent)
Meiotické zrání oocytu je proces přeměny oocytu ve stádiu zárodečného váčku v oocyt ve stádiu metafáze II. Pokud jsou oocyty po dokončení zrání vystaveny prodloužené kultivaci, nastává proces označovaný jako stárnutí oocytu, kdy dochází k poklesu jejich kvality. Přidáním vhodných sloučenin do kultivačních médií lze pozitivně ovlivnit kvalitu zrajících a stárnoucích oocytů. Sulfan je plynná molekula, která je v organismu endogenně produkována a plní zde signální úlohu. Alliin a S-allyl cystein jsou česnekové deriváty, které vykazují v organismu řadu pozitivních účinků, z nichž řada je zprostředkována jejich schopností zvyšovat koncentrace sulfanu.
Byla stanovena hypotéza, podle které lze zlepšit kvalitu oocytů v in vitro kultivačním systému přidáním donoru sulfanu a česnekových derivátů do kultivačního média. Cílem práce bylo vyhodnotit vliv sulfanu a česnekových derivátů na meiotické zrání oocytů, vyhodnotit vliv sulfanu na stárnutí oocytů a zhodnotit vliv kultivace se sulfanem a česnekovými deriváty na časný embryonální vývoj.
Bylo zjištěno, že donor sulfanu urychluje jaderné zrání oocytů a způsobuje dřívější vzestup aktivity MPF a MAPK. Donor sulfanu zvýšil úspěšnost partenogenetické aktivace oocytů. Bylo zjištěno, že během stárnutí prasečích oocytů dochází k endogenní produkci sulfanu, a že tato endogenní produkce sulfanu klesá po prvních 24 hodinách prodloužené kultivace. Inhibitory sulfan uvolňujících enzymů zhoršily kvalitu stárnoucích oocytů. Donor sulfanu zcela potlačil fragmentaci oocytů vystavených prodloužené kultivaci a zlepšil také kvalitu stárnoucích prasečích oocytů ošetřených inhibitory sulfan uvolňujících enzymů. Přítomnost donoru sulfanu během prodloužené kultivace oocytů zlepšila jejich časný embryonální vývoj po partenogenetické aktivaci. Bylo zjištěno, že zatímco alliin narušuje průběh meiotického zrání oocytů, S-allyl cystein nemá na tento proces vliv. S-allyl cystein urychlil nástup rýhování embryí a snížil hladiny ROS ve zrajících a partenogeneticky aktivovaných oocytech.
|
|
|
Srovnání asymbiotických kultur in vitro zástupců rodu Cypripedium
Vetter, Martin
Tato bakalářská práce se zabývá problematikou asymbiotických výsevů in vitro u rodu Cypripedium. Jsou zde shrnuty informace o rodu Cypripedium včetně charakteristiky vysévaných druhů. Je zde řešeno složení kultivačních médií pro asymbiotické výsevy, vliv kinetinu a 6-benzylaminopurinu na klíčivost a vliv přidaných organických složek, jako jsou endosperm z kokosových ořechů, kvasniční extrakt a mrkvový extrakt. S asymbiotickými výsevy se rovněž váže problematika sterility prostředí a metodika povrchové sterilizace semen rodu Cypripedium, která zároveň slouží k vyplavení látek, inhibujících klíčení. Výsledky by měly přispět k rozšíření metodiky pro asymbiotické výsevy o vliv použitých složek organického původu na klíčivost a vývoj protokormů u studovaných druhů rodu Cypripedium.
|
|
|
Metodika in vitro kultivace máku setého a produkce homozygotních materiálů pro šlechtitelské využití
Klíma, Miroslav ; Vyvadilová, Miroslava ; Kučera, Vratislav
„Metodika in vitro kultivace máku setého a produkce homozygotních materiálů pro šlechtitelské využití“ v první části zahrnuje několik variant přípravy a udržování výchozích donorových F1 rostlin s ohledem na kapacitní, prostorové a finanční možnosti uživatelů (šlechtitelů). Zohledňuje i způsob přípravy výchozích materiálů jarního a ozimého typu z hlediska jejich požadavků na přechod do generativní fáze. V další části jsou pak představeny základní techniky a metody popisující odběr explantátů, zakládání prašníkových kultur, regenerace prýtů a celistvých rostlin, převod do nesterilních podmínek, přemnožení, identifikaci a výběr dihaploidních materiálů pro další šlechtění. Rovněž je přiloženo i kompletní složení používaných kultivačních médií; klíčové fáze procedur jsou pro názornost dokumentovány obrazovou přílohou.
Plný text:  PDF
|
host ::
RSS.